Der Bau der St.-Nikolaus-Kathedrale in Sremski Karlovci begann 1758 auf Veranlassung des Karlovacer Metropoliten Pavle Nenadović nach in Wien erstellten Plänen an der Stelle der alten Kirche aus türkischer Zeit. . 1760 wurden der Turm und die Kuppel nach dem Projekt von Zaharij Orfelin gebaut, und die Kirche wurde 1762 vollständig fertiggestellt.
Die Kathedrale des Heiligen Nikolaus in Sremski Karlovci ist einer der wichtigsten Tempel der serbisch-orthodoxen Kirche und hat eine enorme religiöse Bedeutung für Serbien.
Der Tempel hat auch eine große kulturelle und historische Bedeutung. Das Institut für den Schutz von Kulturdenkmälern der Vojvodina hat die Domkirche als Kulturgut von außergewöhnlicher Bedeutung eingestuft, weil sich in ihr neben Fresken, Gemälden von Paja Jovanović und anderen wertvollen religiösen und künstlerischen Gegenständen auch zwei Reliquien befinden - Teile der Reliquien des zweiten serbischen Erzbischofs, des Heiligen Arsenij von Sremac, und die wundertätige Ikone der Allerheiligsten Muttergottes von Bezdinska.